实验方法原理

乙酰胆碱水解酶（AChE）

乙酰胆碱＋H2O → 胆碱＋乙酸

实验材料 ​ ​乙酰胆碱酯酶

试剂、试剂盒 磷酸钾氯化乙酰胆碱白明胶氢氧化钠

实验步骤

空白对照：保持 pH 7.4，持续记录几分钟每次 0.01 mol/L 氢氧化钠的用量。

样品：加入酶溶液（例如 0.1～1 ml），保持 pH 7.0，并记录 5 min 每次 0.01 mol/L 氢氧化钠的用量。

计算 25℃ pH 7.4 时，每分钟一个单位水解的 1 umol 乙酰胆碱。

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注意事项

其他

试剂：

0.02 mol/L 磷酸钾，pH 7.0

0.005 mol/L 氯化乙酰胆碱（Mr＝181.7；91 mg 溶于 100 ml 水中）

0.01％ 白明胶，包括 0.2 mol/L 氯化钠和 0.04 mol/L 氯化钠（0.1 g 白明胶，11.7 g NaCl，8.1 g MgCl2· 6 H2O 溶于 1 L H2O）

0.01 mol/L 氢氧化钠标准溶液作为滴定剂，加入自动滴定器的滴管中

乙酰胆喊酯酶，用 0.02 mol/L 磷酸钾 pH 7.0 稀释到约 20 U/ml