实验方法原理

实验材料 α-胰凝乳蛋白酶

试剂、试剂盒 三甲醇胺-NaOH三甲醇胺-NaOHN-琥珀酰-L-苯丙氨酰对硝基苯胺

仪器、耗材 分光光度计

实验步骤

实验所需「试剂」具体见「其他」

在 25℃。测定 405 nm 吸光值增加，对硝基苯胺的吸收系数为 ε405＝10.2×103 l（mol · cm）

注意事项

其他

试剂：

0.2 mol/L 三甲醇胺-NaOH，pH 7.8（TEA，37.13 g TEA-HCl，2.2 g 氯化钙溶于 800 ml H2O。用 2 mol/L NaOH 调节 pH 7.8，加水至 1 L），即缓冲液Ⅰ

0.2 mol/L 三甲醇胺-NaOH，pH 7.8（TEA，37.13 g TEA-HCl 溶于 800 ml H2O。用 2 mol/L NaOH 调节 pH 7.8，加水至 1 L），即缓冲液Ⅰ

60 umol/L α-胰凝乳蛋白酶（15.2 mg 溶于 10 ml 1 mmol/L HCl 中）

0.1 mol/L N-琥珀酰-L-苯丙氨酰对硝基苯胺（SUPHEPA；Mr=385.4；385 mg溶于 10 ml 缓冲液Ⅱ）